Affi-Gel Blue 介质(血液制品的纯化)

2024-03-28

Affi-Gel Blue 介质(血液制品的纯化)

Affi-Gel Blue 介质是一种交联琼脂糖,带有共价连接的Cibacron Blue F3GA染料。 蓝色染料在各种应用中充当离 子、疏水、芳香或空间活性结合位点。Affi-Gel Blue 介质非常适合去除白蛋白(使用50–100 目)和酶纯化(使用100– 200 目)。通过调节洗脱缓冲液的组成,蛋白质和肽以高度的特异性结合和释放。 

该介质以瓶装或预装柱形式提供。

Af¬-Gel Blue 蓝胶: 

蓝胶中染料配基的功能在各种应用中类似于离子、疏水、芳香或空间结合位点,适用于血清中白蛋白去除和蛋白纯化,如 蛋白激酶、脱氢酶、以及其他核苷酸依赖性酶,特别适用于以 NAD,NADP 类为辅酶的蛋白纯化,包括核苷酸依赖性酶。 另外也适用于一系列血清蛋白和血浆蛋白的纯化如 rat a-fetoprotein,a-2-macroglobulin。

Introduction

亲和凝胶蓝凝胶亲和凝胶是一种串珠,交联琼脂糖凝胶与共价连接的Cibacron Blue F3GA染料。它每毫升凝胶中含有≥1.9mg染料,其白蛋白结合能力大于11 mg/ml。亲和凝胶蓝凝胶纯化了来自广泛的不同来源的大量蛋白质。蓝色染料在各种应用中作为离子、疏水、芳香或空间活性的结合位点。与affi-凝胶蓝凝胶相互作用的蛋白质可以通过操纵洗脱液缓冲液的组成以高度的特异性结合或释放。在许多情况下,人们还可以预测什么将与基质相互作用,以及结合和洗脱将发生的一般条件。

Affi-Gel blue gel 可用作完全水合凝胶的水浆。它有两种方便的颗粒尺寸:快速流动的50-100mesh (150-300µm)和缓慢流动、更高容量的100-200mesh (75-150µm)。该凝胶也可用于方便的Econo-Pac® cartridges,可与Econo系统、FPLC®和HPLC系统一起使用。

在使用染料亲和凝胶时,适当调整样品的pH值和离子强度对于一致和可重复的结果至关重要。必须将样品交换到适当的应用程序缓冲区中。这可以通过使用Econo-Pac 10DG脱盐柱、生物凝胶P-6DG脱盐凝胶或Econo-Pac P6 cartridge将其交换到应用缓冲液中来实现。产品的选择取决于样品的体积。或者,样品可以通过应用程序缓冲器进行透析。所有的样品都应通过一个0.45µm的过滤器进行过滤。

白蛋白去除

亲和凝胶蓝凝胶通过去除主要的血清成分,白蛋白,为纯化许多血清蛋白提供了一个简单的第一步。白蛋白的结合是如此之强,以需要高浓度的盐或离液序列高的试剂来解吸白蛋白。其他血清蛋白要么不与Affi-Gel蓝凝胶结合,要么可以用相对较低浓度的盐洗脱。


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